奥豪斯仪器（上海）有限公司在本文中利用奥豪斯PH计STARTER 3100/F对菌株的最适生长ｐＨ环境进行了测定。

   １奥豪斯仪器分析菌株的筛选及形态学特征

   经过初筛和复筛从污泥土样中筛选出了２株能以萘为唯一碳源进行生长的菌株,分 别 命 名 为ＸＡ１和ＸＢ１ 这２株菌在ＬＢ固体培养基中培养初期均为乳白色菌落,在培养３ｄ之后ＸＡ１和ＸＢ１的菌落颜色均转变成淡黄色,且ＸＡ１的 菌 落 直 径 为２．５３．０ｍｍ,而ＸＢ１在相同的培养时间里菌落直径只有１２ｍｍ,２株菌的菌落特征均为圆形较透明,边缘整齐,表面隆起湿润光滑,易挑起 .在１００倍油镜下观察均为长杆状革兰氏染色结果均为阴性.

   ２奥豪斯仪器上海有限公司对菌株系统发育树的构建及菌种鉴定:将ＸＡ１ＸＢ１的１６ＳｒＤＮＡ序列通过Ｂｌａｓｔ在ＮＣＢＩ上进行相似序列比对结果发现,,ＸＡ１和ＸＢ１与Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．多个菌株的序列相似性均达到９９％ .对菌株的形态观察及１６ＳｒＤＮＡ序列比对结果:可 以 确 定ＸＡ１和ＸＢ１皆属于荧光假单胞菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ.

   ３菌株的生理生化特性

   3.1菌株生长曲线的测定ＸＡ１和ＸＢ１在ＬＢ培养基中９６ｈ的生长状况,ＸＡ１在培养的前３６ｈ为对数生长期３６ ６０ｈ,为稳定生长期６０ｈ,以后进入衰亡期ＸＢ１在培养的前３２ｈ,为对数生长期３２ ８４ｈ,为稳定生长期８４ｈ之后,进入衰亡期.

   3.2菌株最适生长温度的测定: 对ＸＡ１和ＸＢ１在以萘５００ ｍｇＬ为 唯 一 碳 源 的 无 机 盐 培 养 基,PH7.0(利用奥豪斯仪器（上海）有限公司生产的STARTER 3100/F型PH计测定）中于２８３７℃下的生长状况进行观测，结果显示２株菌的最适生长温度均为２８℃， 在３７℃下不能生长。

   3·3 奥豪斯仪器（上海）有限公司利用奥豪斯PH计STARTER 3100/F对菌株最适生长ｐＨ的测定： 对ＸＡ１和ＸＢ１在不同ｐＨ值６．５、７．０、７．５、８．０、８．５以 萘５００ｍｇ/Ｌ为唯一碳源的无机盐ＭＭ培养基中，于２８℃１８０ｒｍｉｎ振荡培养，４ｄ的生长状况进行测定，结果显示ＸＡ１的最适生长ｐＨ为７．５，ＸＢ１的最适生长ｐＨ为７．０。

   3·4 菌株降解谱的测定 ：分 别 以 萘菲联 苯芴荧蒽苯并芘为唯一碳源测定菌株ＸＡ１ＸＢ１和模式菌株ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａＫＴ２４４０于ｐＨ７．２（利用奥豪斯STARTER 3100/F酸度计测量），１８０ｒｍｉｎ下培养１０ｄ的生长状况。结果显示ＸＡ１能以萘菲芴荧蒽为唯一碳源代谢ＸＢ１能以萘菲荧蒽及苯并芘为唯一碳源进行代谢ＸＡ１ＸＢ１的降解谱明显比Ｐ．ｐｕｔｉｄａＫＴ２４４０５菌株ＸＡ１ＸＢ１，对萘的降解特性， 将处于对数生长期的菌株按３％的接种量，接入萘质量浓度为５００ｍｇ/Ｌ的无机盐液体培养基中２８℃，１８０ｒｍｉｎ下恒温振荡培养，可知培养３ｄ后菌株ＸＡ１对萘的降解率达到９３．４％ ＸＢ１对萘的降解率达到７４．７％，菌株ＸＡ１ＸＢ１对萘的降解效果Ｆｉ ｇ．６ＴｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅｂｙＸＡ１ａｎｄ，ＸＢ１６菌株ＸＡ１ＸＢ１降解途径的研究， 将培养到对数期的ＸＡ１和ＸＢ１分别接种到５０ｍＬ以水杨酸ＳＡ０．２ｇＬ和邻苯二甲酸ＯＡ０．２ｇＬ为唯一碳源的无机盐ＭＭ培养基中２８℃１８０ｒｍｉｎ恒温振荡培养结果，表明ＸＡ１和ＸＢ１皆存在水杨酸和邻苯二甲酸２种代谢途径且ＸＡ１和ＸＢ１都以水杨酸代谢途径为主。

   4 部分关键酶基因的ＰＣＲ扩增与鉴定： 选取水杨酸代谢 途 径 的 部 分 关 键 酶 基 因萘 双 加 氧 酶ｎａｈＡＣ 水 杨 醛 脱 氢 酶ｎａｈＦ 水 杨 酸 羟 化 酶ｎａｈＧ和儿茶酚２３－双加氧酶ｎａｈＨ 进行ＰＣＲ扩增通过Ｂｌａｓｔ比对结果，表明ＸＡ１具有ｎａｈＡＣｎａｈＦｎａｈＨ三个基因与文献已报道的基因相似度均达到９９％ ＸＢ１具有ｎａｈＡＣ和ｎａｈＨ两 个 基 因与文献已报道的基因相似度也达到９９％，

可以初步确定ＸＡ１和ＸＢ１是以水杨酸途径对萘进行降解的但２株菌中都没有基因ｎａｈＧ存在证明其还是有别于已知的降解途径。