由中心应急办统一指挥和协调,通知检验科负责人准备开始承担感染者的临床检验工作。准备 检验科负责人接到通知后,立即召开科室紧急启动会议,传达上级指示,布置当前任务。
联系BSL-3实验室负责人,做好仪器和试剂等准备工作。根据检验科应急工作人员安排表组织落实检测人员,检测人员按照《埃博拉出血热个人防护指南(第二版)》[4]的三级个人防护要求做好个人防护,准备接收患者样本进行检测。标本运送 病房将开展相应检验项目的标本经专人专车送往应急实验室(BSL-3),标本运送人员应按照《埃博拉出血热应急工作手册》[5]中的二级个人防护流程做好防护用品的穿戴:戴医用N95口罩和防护眼罩,穿工作服、隔离衣、二层鞋套及防渗漏长靴,戴双层乳胶手套和工作帽。收集标本时必须仔细检查采样容器是否完好无损并盖紧,采样容器上是否写明患者姓名、病区/床号、标本的种类及采样时间(护士填写),确认样本合格并在标本接收登记本上做好登记后,对标本外表面喷洒75%酒精消毒,放入印有生物危害标识的“应急检测标本专用运送箱”(运输包装分类:UN2814类型A类感染性材料),用合适的容器固定,以免颠簸导致泄漏或破碎,再对转运箱的外表面喷洒75%酒精消毒。气温超过25 须在“应急检测标本专用运送箱”内放置医用冰袋,冰袋上放固定容。
标本运送人员在离开病区时,以75%酒精喷洒手套、外层隔离服和鞋套。标本运送人员将“应急检测标本专用运送箱”置于避光、防雨、防震的标本运送车上,须非常仔细、小心地送至应急实验室1楼的标本传递窗内,以紫外线照射表面15 min。
一名生物安全部实验室人员将“应急检测标本专用运送箱”转运至BSL-3实验室准备间的传递窗内,此时一名临床检测实验室工作人员与另一名生
物安全部工作人员做好三级个人防护,进入BSL-3实验室准备间。打开传递窗内的“应急检测标本专用运送箱”,以75%酒精喷洒后取出箱内的内层样本管包装桶并将其转移至核心区的传递窗中,打开紫外线照射5 min。工作人员来到BSL-3实验室核心区,在生物安全柜内打开内层样本管包装桶盖,取出标本管,即1支2 ml EDTA抗凝全血管和1支3.5 ml血清管,分别用于患者的血细胞分析和临床生物化学项目检测。临床生物化学检测项目包括电解质、肝功能和肾功能等基本临床指标。
标本检测 临床实验室工作人员在生物安全部工作人员的配合下,按照SYSMEX XS-1000i全自动血细胞分析仪和FUJI DRI-CHEM4000全自动干式生化分析仪的操作流程,在生物安全柜内完成标本检测。实验操作的动作要轻柔,在工作台面预先铺上铺巾。操作过程中禁止工作人员的手部随意
进出生物安全柜(上海博迅医疗设备厂)。血细胞分析的标本无须打开标本盖,只须将标本放置在SYSMEX XS-1000i全自动血细胞分析仪的进样架上自动检测,检测结果会通过联机系统传送到安全柜外的LIS信息系统电脑上,临床实验室工作人员审核并发布报告。生物化学检测的标本须离心后才能上机检测,离心过程容易产生气溶胶,所以离心和标本开盖上机的一系列操作中须注意很多细节:先将带盖离心桶(转头)放置于安全柜内,将标本喷洒75%酒精消毒后包裹上吸水纸轻轻放入50 ml塑料离心管中,再把离心管放入离心桶中,盖好盖子,消毒离心桶外表面后移出安全
柜,高速冷冻水平离心机3000 rpm/min离心10 min。
离心机停止转动后,静止10 min,然后将离心桶放入上海博迅医疗设备厂生物安全柜内,分别打开桶盖和50 ml离心管盖。打开50 ml离心管盖后,观察有无样本溢出,右手用饱含75%酒精的吸水纸握住标本管盖,左手用饱含75%酒精的吸水纸握住样本管的下部分,轻轻旋转打开标本盖,将标本放入FUJI DRI-CHEM4000全自动干式生化分析仪的标本位,开始检测。
检测结果通过联机系统传送到安全柜外的LIS信息系统电脑上,临床实验室工作人员审核并发布报告。清场与消毒 操作结束后,及时清理生物安全柜内的物品,用75 酒精擦拭外表面后移出生物安全柜放入指定地点。血细胞分析仪和生化分析仪外表面用75%酒精喷洒,作用时间10 min以上。用75%酒精擦拭工作台面、生物安全柜内壁及台面,并继续运行生物安全柜30 min后关闭。确定实验区内无本次操作遗留的物品,检查实验室内压力是否正常。实验人员按照进出BSL-3实验室的操作规程退出实验室。
废弃物处理 所有剩余或废弃标本等污染物装入高压灭菌袋中,用高压指示带松松扎口,并用75%乙醇消毒剂喷洒袋外侧后移出生物安全柜。经
高压蒸汽灭菌后,作为医疗废弃物焚烧。未经许可实验室一律不保存埃博拉病毒血液样本。